哈佛醫(yī)學(xué)院研究發(fā)現(xiàn)：激活B細(xì)胞，可提升TIL細(xì)胞療法成功率2倍

2025-04-14 13:16

來源：澎湃新聞·澎湃號·湃客

在癌癥治療領(lǐng)域，TIL（腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞）療法曾被譽(yù)為最有希望的個體化免疫療法之一。

然而，如何穩(wěn)定高效地擴(kuò)增TIL細(xì)胞，始終是制約其普及和療效提升的關(guān)鍵難題。

近日，哈佛醫(yī)學(xué)院附屬達(dá)納-法伯癌癥研究院團(tuán)隊發(fā)布重磅研究：通過激活腫瘤局部的B細(xì)胞，僅僅一個環(huán)節(jié)的改進(jìn)，就能將TIL擴(kuò)增成功率提高近2倍，從33%躍升至67%。

這一發(fā)現(xiàn)不僅刷新了對腫瘤免疫微環(huán)境的理解，也為提升TIL療法的治療效果、加速其應(yīng)用普及，打開了新的突破口。

細(xì)胞戰(zhàn)爭的戰(zhàn)局，正在被悄悄改寫。

01 TIL療法：曾被寄予厚望，也面臨現(xiàn)實(shí)難題

TIL療法，即腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞治療（Tumor-Infiltrating Lymphocyte Therapy），是一種高度個體化的免疫療法。

它的基本邏輯簡單而有力：從患者自身腫瘤組織中提取已經(jīng)自然滲透進(jìn)去的T細(xì)胞，這些T細(xì)胞本身具備識別并攻擊腫瘤細(xì)胞的潛力。經(jīng)過體外擴(kuò)增和激活后，再大劑量回輸體內(nèi)，強(qiáng)化免疫攻擊力，從而清除癌細(xì)胞。

TIL療法的臨床效果令人振奮。在黑色素瘤、宮頸癌、非小細(xì)胞肺癌等實(shí)體瘤中，部分患者實(shí)現(xiàn)了深度緩解，甚至完全緩解。

黑色素瘤TIL治療的反應(yīng)者（R）和非反應(yīng)者（NR）的免疫細(xì)胞含量分析

美國FDA也于2024年批準(zhǔn)了首款TIL療法（Lifileucel）用于晚期黑色素瘤患者，標(biāo)志著這一療法正式進(jìn)入主流癌癥治療體系。

然而，TIL療法的推廣并不容易，最大的問題在于：

擴(kuò)增難度高：并非每個患者的TIL都能在體外順利擴(kuò)增到治療所需數(shù)量；

擴(kuò)增失敗率高：傳統(tǒng)流程下，TIL擴(kuò)增成功率僅約30%-40%；

細(xì)胞質(zhì)量參差不齊：即便擴(kuò)增成功，不同患者TIL中抗腫瘤活性的T細(xì)胞比例差異巨大，影響治療效果。

換句話說，TIL療法就像一場賭博，很多時候并不是醫(yī)生技術(shù)不到位，而是患者腫瘤組織內(nèi)本身缺乏足夠有戰(zhàn)斗力的細(xì)胞種子。

因此，如何提升TIL擴(kuò)增成功率、提高細(xì)胞質(zhì)量，成為制約這一療法全面普及的核心瓶頸。

哈佛醫(yī)學(xué)院附屬達(dá)納-法伯癌癥研究院團(tuán)隊，正是瞄準(zhǔn)了這個“擴(kuò)增困局”，提出了一個出人意料又極具說服力的解法：激活腫瘤微環(huán)境中的B細(xì)胞。

CD40L增強(qiáng)了黑色素瘤TIL的擴(kuò)張。黑色素瘤單細(xì)胞懸浮液在標(biāo)準(zhǔn)TIL膨脹培養(yǎng)基（對照）或補(bǔ)充CD40（CD40L）激動劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3-4周

02 哈佛團(tuán)隊新發(fā)現(xiàn)：激活B細(xì)胞，TIL擴(kuò)增成功率翻倍

在這項(xiàng)由哈佛醫(yī)學(xué)院附屬達(dá)納-法伯癌癥研究院主導(dǎo)的研究中，科學(xué)家們提出了一個顛覆傳統(tǒng)的假設(shè)：腫瘤組織中的B細(xì)胞，不是旁觀者，而是TIL擴(kuò)增成功與否的重要推手。

通過對黑色素瘤患者樣本的系統(tǒng)分析，研究團(tuán)隊發(fā)現(xiàn)：

TIL擴(kuò)增成功的患者腫瘤組織中，B細(xì)胞尤其是“類切換記憶B細(xì)胞（class-switched memory B-cells）”的比例顯著更高（p=0.007）。

三次淋巴結(jié)構(gòu)（TLS，類似小型淋巴結(jié)的微環(huán)境結(jié)構(gòu)）評分也更高（p=0.03），而TLS往往富含活躍的B細(xì)胞群體。

進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了B細(xì)胞在TIL擴(kuò)增過程中的重要性。

研究者在傳統(tǒng)TIL擴(kuò)增體系中，加入了CD40配體（CD40L）——一種能強(qiáng)烈激活B細(xì)胞的分子信號。

浸潤的黑色素瘤B細(xì)胞對CD40L的反應(yīng)對配體進(jìn)行上調(diào)

結(jié)果非常驚人：加入CD40L后，TIL擴(kuò)增成功率從原本的33%躍升至67%（p=0.03），接近翻倍；擴(kuò)增出來的TIL中，具有更年輕表型（CD39- CD69-）的T細(xì)胞比例更高；新抗原特異性的T細(xì)胞克隆數(shù)量明顯增加，提示抗腫瘤活性更強(qiáng)。

不僅在黑色素瘤中，在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）樣本中，CD40L激活策略同樣有效——TIL擴(kuò)增速度加快（節(jié)省一周培養(yǎng)時間）；新抗原反應(yīng)性T細(xì)胞數(shù)量增加（p≤0.01）。

更深入的單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組分析揭示，CD40L幾乎專門刺激了腫瘤B細(xì)胞，誘導(dǎo)它們上調(diào)共刺激分子（如CD83、CD58）和趨化因子（如CCL22、CCL17），從而為T細(xì)胞擴(kuò)增創(chuàng)造了更有利的局部免疫環(huán)境。

簡而言之，CD40L激活B細(xì)胞，就像在腫瘤微環(huán)境中點(diǎn)燃了一場“細(xì)胞動員令”，讓沉睡的T細(xì)胞得到更好支持、迅速成長為可以用于治療的免疫大軍。

03 激活B細(xì)胞：一場改變TIL療法未來格局的微創(chuàng)新

在以往的癌癥免疫治療研究中，B細(xì)胞往往被忽略。

人們習(xí)慣將注意力集中在T細(xì)胞，尤其是殺傷性T細(xì)胞（CD8+ T細(xì)胞）上，認(rèn)為它們是對抗腫瘤的主力軍。

但哈佛醫(yī)學(xué)院附屬達(dá)納-法伯團(tuán)隊的這項(xiàng)研究顛覆了這一傳統(tǒng)認(rèn)知：B細(xì)胞不僅是“配角”，在TIL擴(kuò)增乃至療效提升中，可能是關(guān)鍵的“助推器”。

（A）腫瘤消化中識別的不同細(xì)胞群的UMAP投影。（B）基于培養(yǎng)條件（CD40L與對照）的腫瘤消化的UMAP投影。（C）B細(xì)胞的UMAP投影，顯示IgA、IgD、IgE、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4和IgM抗體/BCR同型的表達(dá)。（D）B細(xì)胞的UMAP投影顯示由Seurat算法識別的子聚類。與CD40L處理樣品對應(yīng)的集群用紅方表示。（E）將B細(xì)胞集群與之前描述的基因集與原始、記憶、胚胎中心（GC）和漿細(xì)胞相對應(yīng)的基因集交叉引用

具體來說，B細(xì)胞在CD40L刺激下扮演了兩重角色：

增強(qiáng)T細(xì)胞擴(kuò)增的局部環(huán)境：B細(xì)胞被CD40L激活后，大量上調(diào)共刺激分子（如CD58、CD83），這些分子與T細(xì)胞表面受體結(jié)合，為T細(xì)胞提供必需的“第二信號”，促進(jìn)其增殖與存活。

同時，B細(xì)胞釋放出一系列趨化因子（如CCL17、CCL22），進(jìn)一步吸引并聚集潛在的抗腫瘤T細(xì)胞。

提升TIL細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量：研究顯示，經(jīng)過B細(xì)胞激活輔助擴(kuò)增的TIL細(xì)胞，具有更多年輕表型（CD39- CD69-），這類T細(xì)胞被證明在體內(nèi)更具持久性和抗腫瘤活性。

更重要的是，TCR測序發(fā)現(xiàn)，新抗原特異性克隆頻次明顯增加，意味著治療后能更精準(zhǔn)識別和殺傷腫瘤細(xì)胞。