原創(chuàng) 包葉江 檢驗醫(yī)學網(wǎng)

作者：包葉江

單位：中國科學院大學附屬腫瘤醫(yī)院檢驗科（浙江省腫瘤醫(yī)院檢驗科）

血小板聚集會導(dǎo)致血小板計數(shù)假性減少，處理不當容易造成臨床誤診。EDTA依賴性血小板聚集（EDTA-PTCP）被研究得較多，其發(fā)生率約為0.07%-0.21%［1］。此外，由于抽血不當引起的血小板聚集也時有發(fā)生［2］。對于血小板聚集標本的處理流程如何？是否有自動化的解決方案？本文將對以上問題進行重點探討。

01

血小板聚集樣本的常見處理流程

血液樣本檢測時觸發(fā)血細胞分析儀的“血小板聚集”或“血小板降低”報警［3-4］，先推片染色后確認是否有血小板聚集存在：若血小板聚集在鏡下真實存在，可聯(lián)系患者采血后立即檢測或更換抗凝劑（如枸椽酸鈉）后檢測并對結(jié)果進行抗凝劑體積校正［5］，若二次采血重測結(jié)果確認無血小板聚集，以二次采血重測結(jié)果為準發(fā)送報告。也有采用末梢血預(yù)稀釋法進行二次采血檢測［6］：吸取末梢血20μL添加到0.38 mL草酸銨稀釋液中，混勻后沖入計數(shù)池靜置15 min，顯微鏡下計數(shù)3次報告均值結(jié)果。

以上的處理流程均需要二次采血，操作不便，而且受患者依從性的影響。除了二次采血外，還有一些對聚集血小板的體外“解聚”方法，如在抽血后30min內(nèi)加入阿米卡星（一種抗生素）有助于糾正EDTA依賴性血小板聚集的假性PLT降低［7］；此外也有研究表明，上機檢測前對標本進行預(yù)熱［8］或者震蕩［9］，可糾正部分血小板聚集導(dǎo)致的的假性PLT降低。

02

光學血小板（PLT-O）對聚集血小板的“自解聚”現(xiàn)象的案例報道

2019年我們團隊首次在自媒體上報道邁瑞B(yǎng)C-6800血液分析儀網(wǎng)織紅通道的光學血小板(PLT-O)可自動糾正血小板聚集導(dǎo)致的PLT假性減低。據(jù)廠家研發(fā)人員介紹，該儀器的RET通道對聚集血小板的“解聚”機制包括機內(nèi)恒溫預(yù)熱、化學解聚劑和機內(nèi)高速渦旋混勻。因為是機內(nèi)自動進行“解聚”，所以簡稱“自解聚”［10］：

隨后廣州中山大學附屬第一醫(yī)院的鄧間開老師在自媒體上也報道了BC-6800 Plus血液分析儀的光學血小板(PLT-O)對聚集血小板的“自解聚” 功能［11］：

上海瑞金醫(yī)院的郭平老師在《瑞金血液》自媒體上也報道了BC-6800Plus血液分析儀的光學血小板(PLT-O)對聚集血小板的“自解聚” 功能［12］（CDR為BC-6800Plus 血液分析儀上進行的PLT-O檢測）：

03

光學血小板（PLT-O）對聚集血小板的“自解聚”功能分析

為驗證BC-6800光學血小板的“自解聚”功能，我們收集了30例正常對照和23例EDTA依賴性血小板聚集患者的外周血標本，其中23例血小板聚集標本均進行二次采血（更換為枸櫞酸鈉抗凝），且二次采血檢測時均未出現(xiàn)“聚集血小板”報警，鏡檢無血小板聚集。本文中23例血小板聚集標本的血小板真實值均按二次采血檢測的結(jié)果計算，相關(guān)學術(shù)論文已發(fā)表［13］，簡要總結(jié)如下：

23例血小板聚集樣本首次檢測時BC-6800血液分析儀都提示“聚集血小板”報警，顯微鏡鏡下均可見聚集的血小板，但PLT-O結(jié)果即PLT-O（EDTA）顯著高于PLT-I（EDTA），與患者二次采血的PLT真實值即PLT-I（Citrate）接近，見下圖：

而30例無血小板聚集的正常對照樣本的PLT-O結(jié)果與PLT-I結(jié)果無顯著差異，見下圖：

且PLT-O散點圖上也無紅細胞碎片、白細胞碎片等物質(zhì)的干擾，證明PLT-O對EDTA依賴性血小板聚集有“自解聚”作用。我們引入“解聚率”的概念定量這種“自解聚”作用，定義解聚率=血小板聚集標本PLT-O值/PLT真實值*100%，發(fā)現(xiàn)23例血小板聚集樣本中有22例樣本的解聚率大于80%，平均解聚率為93%。

04

光學血小板（PLT-O） “自解聚”功能的應(yīng)用

鑒于BC-6800光學血小板對EDTA依賴性血小板聚集的“自解聚”功能，通過與臨床科室關(guān)于PLT醫(yī)學決定水平的討論，我們重新設(shè)定復(fù)檢規(guī)則和復(fù)檢操作流程，從而降低血小板聚集導(dǎo)致假性血小板降低檢驗報告發(fā)生的幾率并簡化后續(xù)操作流程，對于樣本存在血小板聚集，但PLT-O復(fù)檢結(jié)果在正常參考范圍內(nèi)的結(jié)果，經(jīng)血涂片鏡檢確認后報告PLT-O結(jié)果。

設(shè)置復(fù)檢規(guī)則“當儀器提示‘聚集血小板’報警并且血小板結(jié)果＜100×109/L時，自動開啟網(wǎng)織紅細胞通道（CDR）復(fù)檢PLT-O”并進行血涂片鏡檢，可解決90%以上EDTA依賴性血小板聚集導(dǎo)致的血小板計數(shù)假性減低的難題。對于極個別PLT-O“自解聚”不佳的血小板聚集標本（很可能標本放置時間太長或存在凝塊），通知患者進行更換抗凝劑二次采血檢測。此流程可顯著降低重新抽血的幾率，并杜絕了由于血小板聚集導(dǎo)致錯發(fā)報告的可能性，簡化血小板聚集樣本的復(fù)檢流程，明顯提升患者滿意度，并降低了醫(yī)療風險。

【參考文獻】

[1] 周小棉,鄒曉. 假性血小板減少癥研究進展[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2007, 30(9):1065-1068.

[2] 鄺妙歡, 陸霄云, 鐘義富, 等. 假性血小板減少的相關(guān)因素[J].中山大學學報（醫(yī)學科學版）, 2009, 30(s2):121-124.

[3] 陳瑩瑩, 呂春蘭, 黃晶晶, 等. 邁瑞B(yǎng)C-6800血細胞分析儀血小板聚集報警信息的分析及可靠性評價[J]. 醫(yī)學信息, 2017, 30(1): 269-270.

[4] 曹科, 羅小娟, 李世興, 等. Sysmex XN-3000全自動血細胞分析流水線血小板聚集報警信息的可信性分析[J]. 山東醫(yī)藥, 2017(08):97-99.

[5] 王煒, 陳衛(wèi)民, 倪士剛. EDTA依賴性血小板聚集對血小板計數(shù)的影響及處理方法探討[J]. 國際檢驗醫(yī)學雜志, 2015(22).

[6] 曹錦梅, 王兵. EDTA依賴性假性血小板減少原因分析及糾正方法[J]. 海南醫(yī)學, 2016, 27(11):1881-1882.

[7] Sakurai S, Shiojima I , Tanigawa T , et al. Aminoglycosides prevent and dissociate theaggregation of platelets in patients with EDTA-dependentpseudothrombocytopenia[J]. British Journal of Haematology, 1998, 99(4):817-823.

[8] Williams TL, Archer J. Effect of prewarming EDTA blood samples to 37°C on platelet countmeasured by Sysmex XT‐2000iV in dogs, cats, and horses[J]. Veterinary Clinical Pathology,2015, 45(3):444-449

[9] Gulati G L , Asselta A , Chen C . Using a Vortex To Disaggregate PlateletClumps[J]. Laboratory Medicine, 1997, 28(10):665-667.

[10] https://mp.weixin.qq.com/s/4jWQglTdf8pvUIoeg8rgUA

[11] https://mp.weixin.qq.com/s/FBqfHAp6PBpA9zxB3XLpXw[12] https://mp.weixin.qq.com/s/CRooJcDQIZZBZ-VkRmI97g

[13] Yejiang Bao, Jia Wang, Anjun Wang, et al.Correction of spurious low platelet counts by optical fluorescence plateletcounting of BC-6800 hematology analyzer in EDTA-dependent pseudothrombocytopenia patients. Transl Cancer Res 2020;9(1):166-172

編輯：小冉 審校：Rose

閱讀原文

原標題：《血小板聚集，真的是檢驗科無法破解的密碼嗎？》

閱讀原文